产品名称 | LTB4(Leukotriene B4) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
Uniprot ID | N/A | 别称 | LT-B4 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 4.39 pg/mL |
标准品 | 1000 pg/mL | 检测范围 | 15.63-1000 pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenates, Cell culture supernates and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway;Infection immunity;Endocrinology;Hormone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用LTB4抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的LTB4与包被的LTB4竞争生物素标记的抗LTB4单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,LTB4浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中LTB4的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
1000.00 | 0.188 |
500.00 | 0.324 |
250.00 | 0.539 |
125.00 | 0.873 |
62.50 | 1.301 |
31.25 | 1.693 |
15.63 | 2.069 |
0.00 | 2.509 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 393.70 | 840.34 | 5617.98 | 409.84 | 628.93 | 6993.01 |
Standard deviation | 41.95 | 92.71 | 290.18 | 52.22 | 115.40 | 361.21 |
C V (%) | 4.02 | 4.57 | 5.40 | 5.96 | 7.00 | 4.60 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 89-101 | 95 |
EDTA plasma (n=8) | 82-95 | 88 |
Cell culture media (n=8) | 80-94 | 87 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 87-98 | 93-102 | 82-95 |
Average (%) | 92 | 96 | 86 | |
1:4 | Range (%) | 92-101 | 93-102 | 88-103 |
Average (%) | 96 | 94 | 92 | |
1:8 | Range (%) | 82-98 | 81-96 | 86-97 |
Average (%) | 92 | 82 | 93 | |
1:16 | Range (%) | 89-97 | 93-106 | 87-102 |
Average (%) | 94 | 97 | 92 |