产品名称 | ADT(Androsterone) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
Uniprot ID | N/A | 别称 | 17-Ketosteroid; 17-KS; 3a-Hydroxy-17-Androstanone |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 144 pg/mL |
标准品 | 90000 pg/mL | 检测范围 | 1406.25-90000 pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Endocrinology;Reproductive science;Hormone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用ADT抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的ADT与包被的ADT竞争生物素标记的抗ADT单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,ADT浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中ADT的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
90000.00 | 0.434 |
45000.00 | 0.550 |
22500.00 | 0.746 |
11250.00 | 1.031 |
5625.00 | 1.369 |
2812.50 | 1.684 |
1406.25 | 1.920 |
0.00 | 2.439 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 1771.65 | 3781.51 | 25280.90 | 1844.26 | 2830.19 | 31468.53 |
Standard deviation | 188.78 | 417.20 | 1305.83 | 234.98 | 519.31 | 1625.44 |
C V (%) | 5.05 | 6.64 | 4.15 | 3.80 | 5.33 | 3.56 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-95 | 91 |
EDTA plasma (n=8) | 81-95 | 88 |
Cell culture media (n=8) | 83-97 | 90 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-94 | 85-103 | 87-98 |
Average (%) | 87 | 101 | 91 | |
1:4 | Range (%) | 90-99 | 85-103 | 80-92 |
Average (%) | 92 | 87 | 85 | |
1:8 | Range (%) | 82-101 | 83-96 | 96-105 |
Average (%) | 82 | 94 | 104 | |
1:16 | Range (%) | 91-102 | 95-102 | 86-97 |
Average (%) | 96 | 97 | 92 |