产品名称 | Testosterone ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
Uniprot ID | N/A | 别称 | T; Testesteron; Testeronun |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 0.09 ng/mL |
标准品 | 10ng/mL | 检测范围 | 0.16-10ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Signaling transduction;Cancer;Immunology;Metabolism |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用T抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的T与包被的T竞争生物素标记的抗T单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,T浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中T的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD |
---|---|
10.00 | 0.259 |
5.00 | 0.403 |
2.50 | 0.628 |
1.25 | 1.022 |
0.63 | 1.351 |
0.31 | 1.822 |
0.16 | 1.962 |
0.00 | 2.529 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 78.74 | 168.07 | 112.36 | 81.97 | 125.79 | 139.86 |
Standard deviation | 8.39 | 18.54 | 58.04 | 10.44 | 23.08 | 72.24 |
C V (%) | 3.88 | 7.29 | 3.24 | 3.44 | 7.78 | 5.32 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-99 | 93 |
EDTA plasma (n=8) | 93-107 | 100 |
Cell culture media (n=8) | 87-99 | 93 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 93-102 | 81-94 | 82-96 |
Average (%) | 96 | 86 | 88 | |
1:4 | Range (%) | 80-93 | 81-94 | 89-102 |
Average (%) | 92 | 85 | 95 | |
1:8 | Range (%) | 91-100 | 96-105 | 82-94 |
Average (%) | 95 | 103 | 91 | |
1:16 | Range (%) | 88-95 | 92-103 | 85-96 |
Average (%) | 90 | 99 | 87 |