产品名称 | VB6(Vitamin B6) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
Uniprot ID | N/A | 别称 | Pyridoxine |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 1.42 ng/mL |
标准品 | 300 ng/mL | 检测范围 | 4.69-300 ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Nutrition metabolism;Hormone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用VB6抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的VB6与包被的VB6竞争生物素标记的抗VB6单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,VB6浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中VB6的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD |
---|---|
300.00 | 0.259 |
150.00 | 0.381 |
75.00 | 0.559 |
37.50 | 0.843 |
18.75 | 1.152 |
9.38 | 1.520 |
4.69 | 1.793 |
0.00 | 2.541 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 5.91 | 12.61 | 84.27 | 6.15 | 9.43 | 104.90 |
Standard deviation | 0.63 | 1.39 | 4.35 | 0.78 | 1.73 | 5.42 |
C V (%) | 5.71 | 6.90 | 2.49 | 6.32 | 7.84 | 2.88 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-99 | 93 |
EDTA plasma (n=8) | 90-104 | 97 |
Cell culture media (n=8) | 80-97 | 88 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-92 | 86-100 | 87-96 |
Average (%) | 91 | 87 | 92 | |
1:4 | Range (%) | 80-96 | 86-100 | 96-105 |
Average (%) | 95 | 88 | 96 | |
1:8 | Range (%) | 89-101 | 93-108 | 95-103 |
Average (%) | 95 | 102 | 101 | |
1:16 | Range (%) | 85-97 | 80-101 | 95-103 |
Average (%) | 92 | 88 | 97 |