产品名称 | rT3(Reverse Triiodothyronine) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
Uniprot ID | N/A | 别称 | RT3; r-T3; Reverse T3; (2S)-2-Amino-3-[4-(4-Hydroxy-3,5-Diiodophenoxy)-3-Iodophenyl]propanoic Acid; 3,3',5'-Triiodo-L-thyronine |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 27.55 pg/mL |
标准品 | 6000 pg/mL | 检测范围 | 93.75-6000 pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Infection immunity;Endocrinology;Hormone metabolism;Autoimmunity; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用rT3抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的rT3与包被的rT3竞争生物素标记的抗rT3单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,rT3浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中rT3的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
6000.00 | 0.168 |
3000.00 | 0.346 |
1500.00 | 0.585 |
750.00 | 0.830 |
375.00 | 1.155 |
187.50 | 1.514 |
93.75 | 1.759 |
0.00 | 2.519 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 118.11 | 252.10 | 1685.39 | 122.95 | 188.68 | 2097.90 |
Standard deviation | 12.59 | 27.81 | 87.06 | 15.67 | 34.62 | 108.36 |
C V (%) | 3.55 | 4.63 | 3.34 | 6.03 | 4.41 | 3.61 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 82-96 | 87 |
EDTA plasma (n=8) | 86-97 | 92 |
Cell culture media (n=8) | 84-103 | 96 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 88-97 | 85-104 | 82-90 |
Average (%) | 96 | 88 | 85 | |
1:4 | Range (%) | 91-98 | 85-104 | 85-102 |
Average (%) | 91 | 89 | 97 | |
1:8 | Range (%) | 86-103 | 87-106 | 80-92 |
Average (%) | 93 | 94 | 87 | |
1:16 | Range (%) | 80-91 | 83-92 | 87-103 |
Average (%) | 81 | 84 | 92 |