产品名称 | MF-Human GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P04141 | 别称 | colony stimulating factor 2 (granulocyte-macrophage), Colony-stimulating factor, CSF, CSF2, CSF-2, GMCSF, GM-CSF, GMCSFgranulocyte-macrophage colony-stimulating factor, granulocyte-macrophage colony stimulating factor, Molgramostim, molgramostin, Sargramostim |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 4.69 pg/mL |
标准品 | 500pg/mL | 检测范围 | 7.81-500pg/mL |
样品类型 | 血清,血浆,组织匀浆及其它生物样品;上样量:25μL | ||
检测时间 | 3小时 | 研究领域 | Cancer, Immunology |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人GM-CSF抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人GM-CSF会与包被抗体以及生物素化的抗人GM-CSF抗体结合,游离的成分被洗去。然后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗人GM-CSF抗体与结合在包被抗体上的人GM-CSF结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人GM-CSF浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人GM-CSF的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
500.00 | 3.413 | 3.354 |
250.00 | 2.154 | 2.096 |
125.00 | 1.147 | 1.088 |
62.50 | 0.574 | 0.516 |
31.25 | 0.361 | 0.302 |
15.63 | 0.215 | 0.156 |
7.81 | 0.129 | 0.070 |
0.00 | 0.059 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 14.11 | 69.32 | 137.800 | 14.55 | 77.780 | 230.830 |
Standard deviation | 0.51 | 5.80 | 9.13 | 0.50 | 3.46 | 10.26 |
C V (%) | 4.19 | 2.79 | 7.21 | 6.49 | 4.28 | 2.79 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-99 | 93 |
EDTA plasma (n=8) | 93-107 | 100 |
Cell culture media (n=8) | 85-99 | 92 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 86-96 | 87-96 | 87-96 |
Average (%) | 90 | 89 | 95 | |
1:4 | Range (%) | 93-104 | 87-96 | 92-101 |
Average (%) | 94 | 92 | 95 | |
1:8 | Range (%) | 89-97 | 85-97 | 82-98 |
Average (%) | 91 | 87 | 86 | |
1:16 | Range (%) | 85-94 | 85-94 | 89-97 |
Average (%) | 91 | 88 | 94 |