产品名称 | MF-Human OPG(Osteoprotegerin) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | O00300 | 别称 | OCIF, OCIFMGC29565, OPG, OPG, tumor necrosis factor receptor superfamily member 11B, Osteoclastogenesis inhibitory factor, Osteoprotegerin, TNFRSF11B, TR1, tumor necrosis factor receptor superfamily, member 11b |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.1 ng/mL |
标准品 | 10ng/mL | 检测范围 | 0.16-10ng/mL |
样品类型 | 血清,血浆,唾液及其它生物样品;上样量:25μL | ||
检测时间 | 3小时 | 研究领域 | Cancer, Immunology |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人OPG抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人OPG会与包被抗体以及生物素化的抗人OPG抗体结合,游离的成分被洗去。然后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗人OPG抗体与结合在包被抗体上的人OPG结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人OPG浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人OPG的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
10.00 | 2.426 | 2.358 |
5.00 | 1.741 | 1.673 |
2.50 | 1.025 | 0.957 |
1.25 | 0.518 | 0.450 |
0.63 | 0.279 | 0.211 |
0.31 | 0.156 | 0.088 |
0.16 | 0.109 | 0.041 |
0.00 | 0.068 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 0.17 | 1.46 | 2.770 | 0.28 | 1.790 | 3.380 |
Standard deviation | 0.02 | 0.08 | 0.15 | 0.01 | 0.08 | 0.16 |
C V (%) | 4.84 | 6.57 | 2.56 | 7.49 | 6.00 | 2.74 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-99 | 93 |
EDTA plasma (n=8) | 93-107 | 100 |
Cell culture media (n=8) | 85-99 | 92 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 86-96 | 87-96 | 87-96 |
Average (%) | 90 | 89 | 95 | |
1:4 | Range (%) | 93-104 | 87-96 | 92-101 |
Average (%) | 94 | 92 | 95 | |
1:8 | Range (%) | 89-97 | 85-97 | 82-98 |
Average (%) | 91 | 87 | 86 | |
1:16 | Range (%) | 85-94 | 85-94 | 89-97 |
Average (%) | 91 | 88 | 94 |