产品名称 | MF-Human GDF15(Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | Q99988 | 别称 | GDF15, GDF-15, growth differentiation factor 15, growth/differentiation factor 15, Macrophage inhibitory cytokine 1, MIC-1, MIC-1NSAID-activated gene 1 protein, MIC1Prostate differentiation factor, NAG-1, NAG-1NSAID-regulated gene 1 protein, NSAID (nonsteroidal inflammatory drug)-activated protein 1, PDF, PDFGDF-15, PLAB, PLABNRG-1, Placental bone morphogenetic protein, Placental TGF-beta, PTGF-beta, PTGFBPTGF-beta |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 18.75 pg/mL |
标准品 | 2000pg/mL | 检测范围 | 31.25-2000pg/mL |
样品类型 | 血清,血浆,组织匀浆及其它生物样品;上样量:25μL | ||
检测时间 | 3小时 | 研究领域 | Cancer, Immunology, Cell biology |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人GDF15抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人GDF15会与包被抗体以及生物素化的抗人GDF15抗体结合,游离的成分被洗去。然后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗人GDF15抗体与结合在包被抗体上的人GDF15结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人GDF15浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人GDF15的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
2000.00 | 2.898 | 2.873 |
1000.00 | 1.617 | 1.592 |
500.00 | 0.808 | 0.783 |
250.00 | 0.491 | 0.466 |
125.00 | 0.296 | 0.271 |
62.50 | 0.169 | 0.144 |
31.25 | 0.100 | 0.075 |
0.00 | 0.025 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 30.47 | 259.39 | 411.330 | 25.90 | 330.090 | 705.790 |
Standard deviation | 1.22 | 12.21 | 24.53 | 1.51 | 17.34 | 32.54 |
C V (%) | 2.85 | 5.10 | 5.69 | 4.10 | 6.80 | 3.63 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 82-97 | 92 |
EDTA plasma (n=8) | 87-99 | 94 |
Cell culture media (n=8) | 84-95 | 88 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-94 | 85-92 | 91-99 |
Average (%) | 85 | 87 | 96 | |
1:4 | Range (%) | 87-103 | 85-92 | 88-102 |
Average (%) | 99 | 88 | 93 | |
1:8 | Range (%) | 81-95 | 89-103 | 86-92 |
Average (%) | 87 | 94 | 88 | |
1:16 | Range (%) | 82-90 | 97-105 | 81-93 |
Average (%) | 88 | 103 | 92 |