产品名称 | E2(Estradiol) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
Uniprot ID | N/A | 别称 | Oestradiol; E2; 17β-Estradiol; Estra-1,3,5(10)-triene-3,17β-diol |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 7.5 pg/mL |
标准品 | 800pg/mL | 检测范围 | 12.5-800 pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Signaling transduction;Cancer;Metabolism |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用E2抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的E2与包被的E2竞争生物素标记的抗E2单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,E2浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中E2的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
800.00 | 0.185 |
400.00 | 0.345 |
200.00 | 0.624 |
100.00 | 0.968 |
50.00 | 1.385 |
25.00 | 1.648 |
12.50 | 1.825 |
0.00 | 2.061 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 31.45 | 229.97 | 467.03 | 34.84 | 358.03 | 462.22 |
Standard deviation | 1.21 | 13.76 | 24.99 | 1.70 | 15.39 | 34.57 |
C V (%) | 5.17 | 6.47 | 2.65 | 4.50 | 3.22 | 4.77 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 83-97 | 90 |
EDTA plasma (n=8) | 80-97 | 88 |
Cell culture media (n=8) | 85-101 | 93 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-94 | 85-102 | 89-98 |
Average (%) | 88 | 95 | 95 | |
1:4 | Range (%) | 87-96 | 85-102 | 80-97 |
Average (%) | 89 | 87 | 93 | |
1:8 | Range (%) | 92-105 | 80-92 | 96-104 |
Average (%) | 99 | 81 | 99 | |
1:16 | Range (%) | 89-102 | 87-103 | 85-93 |
Average (%) | 99 | 95 | 93 |