产品名称 | Mouse High Sensitivity IL-13(Interleukin 13) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | P20109 | 别称 | BHR1, Interleukin-13, IL13, IL-13, Interleukin 13, NC30, P600, ALRH |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.07 pg/mL |
标准品 | 20pg/mL | 检测范围 | 0.31-20pg/mL |
样品类型 | 血清,血浆,组织匀浆及其它生物样品;上样量:100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Signal transduction |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IL-13抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠IL-13会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠IL-13抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠IL-13抗体与结合在包被抗体上的小鼠IL-13结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠IL-13浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠IL-13的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
20.00 | 2.311 | 2.250 |
10.00 | 1.530 | 1.469 |
5.00 | 0.825 | 0.764 |
2.50 | 0.416 | 0.355 |
1.25 | 0.242 | 0.181 |
0.63 | 0.146 | 0.085 |
0.31 | 0.100 | 0.039 |
0.00 | 0.061 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 3.45 | 4.56 | 8.38 | 4.14 | 2.78 | 10.04 |
Standard deviation | 2.96 | 2.35 | 3.94 | 1.92 | 16.10 | 9.18 |
C V (%) | 5.21 | 3.29 | 5.64 | 7.55 | 4.27 | 3.96 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 84-96 | 90 |
EDTA plasma (n=8) | 96-107 | 101 |
Cell culture media (n=8) | 87-99 | 92 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 93-106 | 88-98 | 95-103 |
Average (%) | 95 | 95 | 93 | |
1:4 | Range (%) | 87-99 | 87-103 | 80-97 |
Average (%) | 90 | 96 | 89 | |
1:8 | Range (%) | 85-93 | 89-97 | 93-102 |
Average (%) | 89 | 93 | 93 | |
1:16 | Range (%) | 80-96 | 85-94 | 87-103 |
Average (%) | 89 | 90 | 95 |