产品名称 | Mouse α-CTx(Alpha Crosslaps) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | N/A | 别称 | a-CTXI, aCTX-I, A-Cr, Type I Collagen C-Telopeptide-Related Fraction |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 46.88 pg/mL |
标准品 | 5000pg/mL | 检测范围 | 78.13-5000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Tumor immunity;Infection immunity;Hepatology; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用小鼠α-CTx抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠α-CTx与包被的小鼠α-CTx竞争生物素标记的抗小鼠α-CTx单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠α-CTx浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠α-CTx的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
5000.00 | 0.180 |
2500.00 | 0.318 |
1250.00 | 0.537 |
625.00 | 0.868 |
312.50 | 1.289 |
156.25 | 1.746 |
78.13 | 2.055 |
0.00 | 2.535 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 89.76 | 1000.85 | 1500.81 | 252.29 | 1174.20 | 2526.64 |
Standard deviation | 0.37 | 58.12 | 74.73 | 7.97 | 56.14 | 72.11 |
C V (%) | 7.09 | 5.37 | 4.01 | 6.93 | 4.71 | 3.32 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-90 | 85 |
EDTA plasma (n=8) | 84-106 | 100 |
Cell culture media (n=8) | 87-93 | 90 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-94 | 93-102 | 80-93 |
Average (%) | 90 | 96 | 92 | |
1:4 | Range (%) | 87-96 | 93-102 | 88-97 |
Average (%) | 91 | 101 | 92 | |
1:8 | Range (%) | 82-95 | 80-92 | 86-92 |
Average (%) | 84 | 88 | 87 | |
1:16 | Range (%) | 81-93 | 87-98 | 95-103 |
Average (%) | 88 | 92 | 96 |