产品名称 | MF-Human IL-8(Interleukin 8) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P10145 | 别称 | 3-10C, AMCF-I, C-X-C motif chemokine 8, CXCL8, CXCL8SCYB8, Emoctakin, GCP1, GCP-1TSG-1, IL8, IL-8, interleukin 8, K60, LAI, LECT, LUCT, LYNAP, MDNCF, MDNCFb-ENAP, member 8, MONAP, MONAPGCP1, NAF, NAP1, NAP-1NAP1, NCF, Neutrophil-activating protein 1, Protein 3-10C, T cell chemotactic factor, T-cell chemotactic factor, TCF, TSG1 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.56 pg/mL |
标准品 | 200pg/mL | 检测范围 | 3.12-200pg/mL |
样品类型 | 血清,血浆,组织匀浆及其它生物样品;上样量:25μL | ||
检测时间 | 3小时 | 研究领域 | Tumor immunity; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人IL-8抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人IL-8会与包被抗体以及生物素化的抗人IL-8抗体结合,游离的成分被洗去。然后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗人IL-8抗体与结合在包被抗体上的人IL-8结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人IL-8浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人IL-8的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
200.00 | 2.319 | 2.244 |
100.00 | 1.464 | 1.389 |
50.00 | 0.862 | 0.787 |
25.00 | 0.548 | 0.473 |
12.50 | 0.298 | 0.223 |
6.25 | 0.194 | 0.119 |
3.13 | 0.133 | 0.058 |
0.00 | 0.075 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 118.90 | 105.08 | 18.149 | 88.50 | 9.709 | 21.915 |
Standard deviation | 4.30 | 5.15 | 8.65 | 0.75 | 3.26 | 11.08 |
C V (%) | 5.43 | 2.55 | 7.06 | 6.60 | 3.02 | 7.58 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 85-103 | 94 |
EDTA plasma (n=8) | 95-105 | 100 |
Cell culture media (n=8) | 93-101 | 97 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 89-97 | 85-94 | 82-98 |
Average (%) | 90 | 89 | 88 | |
1:4 | Range (%) | 85-94 | 85-94 | 87-91 |
Average (%) | 88 | 94 | 91 | |
1:8 | Range (%) | 87-96 | 87-96 | 85-93 |
Average (%) | 93 | 93 | 89 | |
1:16 | Range (%) | 85-97 | 92-101 | 89-97 |
Average (%) | 94 | 93 | 93 |