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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Biotin Quantitative Determination ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
| Uniprot ID | N/A | 别称 | |
| 检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 5.35 pg/mL |
| 标准品 | 500pg/mL | 检测范围 | 7.81-500 pg/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
| 检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Immunology |
| 测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用Biotin抗原包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的Biotin与包被的Biotin竞争生物素标记的抗Biotin单抗上的结合位点，游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，Biotin浓度与OD450值之间呈反比，通过绘制标准曲线计算出样品中Biotin的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD |
|---|---|
| 500.00 | 0.254 |
| 250.00 | 0.376 |
| 125.00 | 0.561 |
| 62.50 | 0.807 |
| 31.25 | 1.089 |
| 15.63 | 1.382 |
| 7.81 | 1.658 |
| 0.00 | 2.445 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 196.85 | 420.17 | 280.99 | 204.92 | 314.47 | 349.50 |
| Standard deviation | 20.98 | 46.36 | 145.09 | 26.11 | 57.70 | 180.60 |
| C V (%) | 4.35 | 4.50 | 4.24 | 3.86 | 5.94 | 5.43 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 90-105 | 97 |
| EDTA plasma (n=8) | 80-95 | 87 |
| Cell culture media (n=8) | 83-95 | 89 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 80-91 | 86-97 | 92-105 |
| Average (%) | 81 | 97 | 93 | |
| 1:4 | Range (%) | 89-103 | 86-97 | 87-98 |
| Average (%) | 90 | 88 | 95 | |
| 1:8 | Range (%) | 82-95 | 90-98 | 85-92 |
| Average (%) | 92 | 97 | 91 | |
| 1:16 | Range (%) | 86-99 | 80-93 | 80-96 |
| Average (%) | 94 | 87 | 95 |
检测流程/ Assay Procedures
