产品名称 | Mouse High Sensitivity IL-17A(Interleukin 17A) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | Q62386 | 别称 | CTLA8, CTLA-8, CTLA8cytotoxic T-lymphocyte-associated serine esterase 8, Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen 8, IL17, IL-17, IL17A, IL-17A, IL-17Acytotoxic T-lymphocyte-associated protein 8, IL-17CTLA-8 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.41 pg/mL |
标准品 | 50pg/mL | 检测范围 | 0.78-50pg/mL |
样品类型 | 血清,血浆,组织匀浆及其它生物样品;上样量:100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Enzyme & Kinase; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IL-17A抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠IL-17A会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠IL-17A抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠IL-17A抗体与结合在包被抗体上的小鼠IL-17A结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠IL-17A浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠IL-17A的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
50.00 | 2.486 | 2.435 |
25.00 | 1.630 | 1.579 |
12.50 | 0.964 | 0.913 |
6.25 | 0.445 | 0.394 |
3.13 | 0.236 | 0.185 |
1.56 | 0.138 | 0.087 |
0.78 | 0.086 | 0.035 |
0.00 | 0.051 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 38.51 | 35.66 | 17.71 | 43.09 | 16.24 | 37.22 |
Standard deviation | 2.70 | 19.28 | 42.39 | 2.83 | 13.12 | 31.86 |
C V (%) | 4.47 | 6.45 | 6.76 | 3.06 | 5.60 | 3.36 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-97 | 88 |
EDTA plasma (n=8) | 83-95 | 89 |
Cell culture media (n=8) | 88-102 | 95 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 90-107 | 95-104 | 93-102 |
Average (%) | 100 | 101 | 99 | |
1:4 | Range (%) | 91-102 | 97-106 | 95-106 |
Average (%) | 99 | 102 | 99 | |
1:8 | Range (%) | 90-103 | 92-101 | 93-99 |
Average (%) | 99 | 100 | 98 | |
1:16 | Range (%) | 92-105 | 92-108 | 95-102 |
Average (%) | 98 | 102 | 101 |