产品名称 | Rat C9(Complement Component 9) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
Uniprot ID | N/A | 别称 | C9 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 5.63 ng/mL |
标准品 | 600ng/mL | 检测范围 | 9.38-600ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Tumor immunity; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠 C9抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠 C9会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠 C9抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠 C9抗体与结合在包被抗体上的大鼠 C9结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,大鼠 C9浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠 C9的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
600.00 | 2.789 | 2.731 |
300.00 | 1.727 | 1.669 |
150.00 | 0.990 | 0.932 |
75.00 | 0.461 | 0.403 |
37.50 | 0.243 | 0.185 |
18.75 | 0.136 | 0.078 |
9.38 | 0.091 | 0.033 |
0.00 | 0.058 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 11.38 | 75.16 | 299.17 | 11.12 | 114.40 | 240.32 |
Standard deviation | 0.80 | 4.55 | 8.82 | 0.95 | 7.14 | 12.16 |
C V (%) | 4.57 | 6.85 | 6.79 | 5.34 | 5.43 | 6.99 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-95 | 91 |
EDTA plasma (n=8) | 96-107 | 102 |
Cell culture media (n=8) | 80-96 | 87 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 95-103 | 88-98 | 85-94 |
Average (%) | 98 | 90 | 87 | |
1:4 | Range (%) | 87-98 | 88-98 | 95-103 |
Average (%) | 96 | 95 | 102 | |
1:8 | Range (%) | 85-92 | 87-103 | 80-97 |
Average (%) | 87 | 101 | 80 | |
1:16 | Range (%) | 80-96 | 89-97 | 93-102 |
Average (%) | 86 | 92 | 93 |