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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Rat HSP-90(Heat Shock Protein 90) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
| Uniprot ID | N/A | 别称 | Hsp90 |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 75 pg/mL |
| 标准品 | 8000pg/mL | 检测范围 | 125-8000pg/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Tumor immunity;Endocrinology;Hormone metabolism; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠 HSP-90抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的大鼠 HSP-90会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠 HSP-90抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠 HSP-90抗体与结合在包被抗体上的大鼠 HSP-90结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，大鼠 HSP-90浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠 HSP-90的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 8000.00 | 2.447 | 2.418 |
| 4000.00 | 1.596 | 1.567 |
| 2000.00 | 0.954 | 0.925 |
| 1000.00 | 0.446 | 0.417 |
| 500.00 | 0.219 | 0.190 |
| 250.00 | 0.109 | 0.080 |
| 125.00 | 0.064 | 0.035 |
| 0.00 | 0.029 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 210.96 | 1732.02 | 3600.83 | 227.70 | 1697.17 | 3617.27 |
| Standard deviation | 10.03 | 90.61 | 103.28 | 12.78 | 89.83 | 155.34 |
| C V (%) | 5.67 | 3.41 | 3.55 | 4.47 | 3.84 | 7.85 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 86-99 | 92 |
| EDTA plasma (n=8) | 80-95 | 87 |
| Cell culture media (n=8) | 83-98 | 90 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 85-104 | 88-104 | 85-96 |
| Average (%) | 99 | 99 | 91 | |
| 1:4 | Range (%) | 83-96 | 84-98 | 87-101 |
| Average (%) | 83 | 91 | 91 | |
| 1:8 | Range (%) | 95-103 | 95-105 | 89-102 |
| Average (%) | 98 | 99 | 92 | |
| 1:16 | Range (%) | 88-95 | 88-102 | 85-98 |
| Average (%) | 94 | 90 | 86 |