产品名称 | Rat AP36(Apelin 36) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
Uniprot ID | N/A | 别称 | AP36 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 18.75 pg/mL |
标准品 | 2000pg/mL | 检测范围 | 31.25-2000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Immunology;Cardiovascular |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用大鼠AP36抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠AP36与包被的大鼠AP36竞争生物素标记的抗大鼠AP36单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,大鼠AP36浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠AP36的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
2000.00 | 0.203 | 0.000 |
1000.00 | 0.339 | 0.000 |
500.00 | 0.554 | 0.000 |
250.00 | 0.888 | 0.000 |
125.00 | 1.316 | 0.000 |
62.50 | 1.708 | 0.000 |
31.25 | 2.084 | 0.000 |
0.00 | 2.524 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 36.85 | 330.40 | 993.68 | 62.30 | 386.66 | 814.06 |
Standard deviation | 4.42 | 19.53 | 29.85 | 4.61 | 20.79 | 44.75 |
C V (%) | 3.31 | 6.96 | 6.24 | 7.18 | 4.22 | 3.12 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 81-95 | 88 |
EDTA plasma (n=8) | 87-99 | 93 |
Cell culture media (n=8) | 87-99 | 93 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 95-104 | 92-106 | 87-96 |
Average (%) | 100 | 98 | 90 | |
1:4 | Range (%) | 82-94 | 92-106 | 85-92 |
Average (%) | 85 | 94 | 91 | |
1:8 | Range (%) | 86-96 | 92-101 | 80-96 |
Average (%) | 95 | 94 | 94 | |
1:16 | Range (%) | 81-97 | 80-95 | 89-100 |
Average (%) | 86 | 81 | 95 |