产品名称 | Mouse INSR(Insulin Receptor) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | P15208 | 别称 | INSRβ |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.56 ng/mL |
标准品 | 60ng/mL | 检测范围 | 0.94-60ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Reproductive science;Developmental science; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠 INSR抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠 INSR会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠 INSR抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠 INSR抗体与结合在包被抗体上的小鼠 INSR结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠 INSR浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 INSR的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
60.00 | 2.752 | 2.731 |
30.00 | 1.690 | 1.669 |
15.00 | 0.953 | 0.932 |
7.50 | 0.424 | 0.403 |
3.75 | 0.206 | 0.185 |
1.88 | 0.099 | 0.078 |
0.94 | 0.054 | 0.033 |
0.00 | 0.021 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 1.21 | 14.04 | 20.16 | 1.68 | 9.96 | 18.40 |
Standard deviation | 0.06 | 0.48 | 1.24 | 0.07 | 0.54 | 1.12 |
C V (%) | 3.24 | 6.40 | 5.21 | 7.12 | 5.28 | 5.29 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 95-107 | 101 |
EDTA plasma (n=8) | 80-95 | 87 |
Cell culture media (n=8) | 88-103 | 95 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 93-105 | 88-97 | 85-101 |
Average (%) | 97 | 89 | 91 | |
1:4 | Range (%) | 80-86 | 86-92 | 80-96 |
Average (%) | 81 | 89 | 95 | |
1:8 | Range (%) | 87-103 | 81-93 | 87-99 |
Average (%) | 87 | 88 | 90 | |
1:16 | Range (%) | 85-97 | 93-104 | 96-107 |
Average (%) | 95 | 98 | 103 |