产品名称 | Mouse PGF(Placental Growth Factor) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | P49764 | 别称 | PLGF, PGFL, PlGF-2, SHGC-176, D12S19 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 7.5 pg/mL |
标准品 | 800pg/mL | 检测范围 | 12.5-800pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Endocrinology;Neuro science;Hepatology;Hormone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠 PGF抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠 PGF会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠 PGF抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠 PGF抗体与结合在包被抗体上的小鼠 PGF结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠 PGF浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 PGF的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
800.00 | 2.470 | 2.418 |
400.00 | 1.619 | 1.567 |
200.00 | 0.977 | 0.925 |
100.00 | 0.469 | 0.417 |
50.00 | 0.242 | 0.190 |
25.00 | 0.132 | 0.080 |
12.50 | 0.087 | 0.035 |
0.00 | 0.052 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 20.35 | 117.23 | 247.35 | 26.08 | 120.81 | 360.75 |
Standard deviation | 0.86 | 7.32 | 10.39 | 0.87 | 6.43 | 16.04 |
C V (%) | 4.10 | 5.03 | 5.57 | 3.31 | 6.83 | 3.11 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-99 | 93 |
EDTA plasma (n=8) | 82-98 | 90 |
Cell culture media (n=8) | 90-107 | 98 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 82-93 | 88-102 | 87-94 |
Average (%) | 83 | 92 | 88 | |
1:4 | Range (%) | 95-104 | 87-102 | 85-96 |
Average (%) | 100 | 89 | 86 | |
1:8 | Range (%) | 82-96 | 85-96 | 89-100 |
Average (%) | 88 | 91 | 95 | |
1:16 | Range (%) | 85-98 | 87-101 | 85-96 |
Average (%) | 88 | 97 | 89 |