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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Mouse GAPDH(Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
| Uniprot ID | P16858 | 别称 | G3PDH,G3PD, GAPD |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.1 ng/mL |
| 标准品 | 10ng/mL | 检测范围 | 0.16-10ng/mL |
| 样品类型 | Tissue homogenate and Cell lysate；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway;Endocrinology; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠 GAPDH抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠 GAPDH会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠 GAPDH抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠 GAPDH抗体与结合在包被抗体上的小鼠 GAPDH结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，小鼠 GAPDH浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 GAPDH的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 10.00 | 2.425 | 2.358 |
| 5.00 | 1.740 | 1.673 |
| 2.50 | 1.024 | 0.957 |
| 1.25 | 0.517 | 0.450 |
| 0.63 | 0.278 | 0.211 |
| 0.32 | 0.155 | 0.088 |
| 0.16 | 0.108 | 0.041 |
| 0.00 | 0.067 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 0.17 | 1.87 | 3.31 | 0.18 | 1.79 | 4.81 |
| Standard deviation | 0.01 | 0.09 | 0.23 | 0.02 | 0.12 | 0.24 |
| C V (%) | 6.88 | 5.15 | 5.83 | 3.00 | 4.84 | 6.51 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 87-99 | 93 |
| EDTA plasma (n=8) | 80-92 | 85 |
| Cell culture media (n=8) | 92-107 | 99 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 81-93 | 80-102 | 88-97 |
| Average (%) | 81 | 81 | 92 | |
| 1:4 | Range (%) | 80-91 | 80-102 | 88-103 |
| Average (%) | 82 | 99 | 89 | |
| 1:8 | Range (%) | 87-98 | 83-96 | 86-92 |
| Average (%) | 95 | 90 | 88 | |
| 1:16 | Range (%) | 95-107 | 80-93 | 91-99 |
| Average (%) | 104 | 86 | 94 |