产品名称 | Mouse TG(Thyroglobulin) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | O08710 | 别称 | AITD3, TGN |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 75 pg/mL |
标准品 | 8000pg/mL | 检测范围 | 125-8000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway;Endocrinology;Hormone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠 TG抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠 TG会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠 TG抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠 TG抗体与结合在包被抗体上的小鼠 TG结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠 TG浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 TG的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
8000.00 | 2.458 | 2.418 |
4000.00 | 1.607 | 1.567 |
2000.00 | 0.965 | 0.925 |
1000.00 | 0.457 | 0.417 |
500.00 | 0.230 | 0.190 |
250.00 | 0.120 | 0.080 |
125.00 | 0.075 | 0.035 |
0.00 | 0.040 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 177.78 | 1101.16 | 3476.54 | 207.37 | 2115.19 | 2997.93 |
Standard deviation | 11.82 | 59.18 | 135.32 | 13.00 | 78.35 | 143.69 |
C V (%) | 3.29 | 3.98 | 7.45 | 4.97 | 4.95 | 4.30 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-92 | 85 |
EDTA plasma (n=8) | 90-105 | 97 |
Cell culture media (n=8) | 80-97 | 88 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 80-92 | 86-93 | 88-104 |
Average (%) | 80 | 89 | 100 | |
1:4 | Range (%) | 83-96 | 91-105 | 84-98 |
Average (%) | 90 | 101 | 87 | |
1:8 | Range (%) | 95-107 | 87-98 | 95-105 |
Average (%) | 97 | 88 | 102 | |
1:16 | Range (%) | 87-102 | 89-94 | 88-102 |
Average (%) | 98 | 90 | 91 |