产品名称 | Mouse OFQ/N(Orphanin FQ/Nociceptin) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | N/A | 别称 | PPNOC, nocistatin|propronociceptin |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 4.69 pg/mL |
标准品 | 500pg/mL | 检测范围 | 7.82-500pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用小鼠OFQ/N抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠OFQ/N与包被的小鼠OFQ/N竞争生物素标记的抗小鼠OFQ/N单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠OFQ/N浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠OFQ/N的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
500.00 | 0.188 |
250.00 | 0.326 |
125.00 | 0.545 |
62.50 | 0.876 |
31.25 | 1.297 |
15.63 | 1.754 |
7.82 | 2.063 |
0.00 | 2.543 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 24.04 | 118.24 | 138.62 | 32.50 | 99.08 | 211.77 |
Standard deviation | 0.67 | 4.60 | 8.18 | 0.50 | 4.03 | 9.04 |
C V (%) | 5.45 | 3.90 | 6.78 | 3.21 | 6.06 | 7.80 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-99 | 93 |
EDTA plasma (n=8) | 80-92 | 85 |
Cell culture media (n=8) | 92-107 | 99 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 81-93 | 80-102 | 88-97 |
Average (%) | 81 | 81 | 92 | |
1:4 | Range (%) | 80-91 | 80-102 | 88-103 |
Average (%) | 82 | 99 | 89 | |
1:8 | Range (%) | 87-98 | 83-96 | 86-92 |
Average (%) | 95 | 90 | 88 | |
1:16 | Range (%) | 95-107 | 80-93 | 91-99 |
Average (%) | 104 | 86 | 94 |