产品名称 | Mouse DPD(Deoxypyridinoline) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | N/A | 别称 | Pyrilinks-D, deoxyPYD |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 1.88 ng/mL |
标准品 | 200ng/mL | 检测范围 | 3.13-200ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Signal transduction;Hematology; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用小鼠DPD抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠DPD与包被的小鼠DPD竞争生物素标记的抗小鼠DPD单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠DPD浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠DPD的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD |
---|---|
200.00 | 0.201 |
100.00 | 0.337 |
50.00 | 0.552 |
25.00 | 0.886 |
12.50 | 1.314 |
6.25 | 1.706 |
3.13 | 2.082 |
0.00 | 2.522 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 6.70 | 37.01 | 97.65 | 9.98 | 39.39 | 78.07 |
Standard deviation | 0.13 | 1.48 | 3.15 | 0.01 | 1.35 | 4.95 |
C V (%) | 4.27 | 4.43 | 4.52 | 4.72 | 7.10 | 6.59 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 81-95 | 88 |
EDTA plasma (n=8) | 86-99 | 92 |
Cell culture media (n=8) | 89-105 | 97 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-92 | 98-105 | 89-97 |
Average (%) | 92 | 99 | 89 | |
1:4 | Range (%) | 95-103 | 98-105 | 95-106 |
Average (%) | 102 | 102 | 104 | |
1:8 | Range (%) | 97-105 | 86-92 | 87-96 |
Average (%) | 98 | 89 | 90 | |
1:16 | Range (%) | 93-102 | 91-103 | 82-90 |
Average (%) | 101 | 92 | 85 |