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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Mouse VIP(Vasoactive Intestinal Peptide) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
| Uniprot ID | P32648(125~152aa) | 别称 | PHM27 |
| 检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 7.5 pg/mL |
| 标准品 | 800pg/mL | 检测范围 | 12.5-800pg/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=50μL | ||
| 检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Neuro science;Gastroenterology;Hormone metabolism; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用小鼠VIP抗原包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠VIP与包被的小鼠VIP竞争生物素标记的抗小鼠VIP单抗上的结合位点，游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，小鼠VIP浓度与OD450值之间呈反比，通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠VIP的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD |
|---|---|
| 800.00 | 0.220 |
| 400.00 | 0.377 |
| 200.00 | 0.587 |
| 100.00 | 0.851 |
| 50.00 | 1.135 |
| 25.00 | 1.435 |
| 12.50 | 1.769 |
| 0.00 | 2.565 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 8.46 | 152.46 | 373.26 | 34.26 | 199.06 | 411.38 |
| Standard deviation | 0.01 | 8.35 | 14.50 | 1.65 | 8.02 | 16.59 |
| C V (%) | 3.48 | 3.06 | 7.00 | 7.55 | 6.10 | 4.21 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 87-99 | 93 |
| EDTA plasma (n=8) | 80-90 | 84 |
| Cell culture media (n=8) | 89-107 | 98 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 86-97 | 87-94 | 81-90 |
| Average (%) | 90 | 90 | 89 | |
| 1:4 | Range (%) | 88-95 | 87-94 | 83-92 |
| Average (%) | 88 | 92 | 86 | |
| 1:8 | Range (%) | 92-101 | 85-96 | 92-96 |
| Average (%) | 97 | 92 | 95 | |
| 1:16 | Range (%) | 87-98 | 92-102 | 86-98 |
| Average (%) | 91 | 92 | 95 |