| 产品名称 | FS-Human IgE(Immunoglobulin E) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
| Uniprot ID | N/A | 别称 | IgE |
| 检测方法 | Sandwich | 灵敏度 | 0.06 ng/mL |
| 标准品 | 20ng/mL | 检测范围 | 0.31-20ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
| 检测时间 | 1.5H | 研究领域 | Signal transduction;Hematology;Cardiovascular biology;Neuro science; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人IgE抗体包被于酶标板上,实验时加入样品(或标准品)和辣根过氧化物酶标记的抗人IgE检测抗体,样本(或标准品中)的人IgE会与包被抗体及辣根过氧化物酶标记的抗人IgE抗体结合,形成双抗体夹心的免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值,人IgE浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人IgE的浓度。 | ||
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 20.00 | 2.322 | 2.284 |
| 10.00 | 1.528 | 1.490 |
| 5.00 | 0.897 | 0.859 |
| 2.50 | 0.414 | 0.376 |
| 1.25 | 0.235 | 0.197 |
| 0.63 | 0.135 | 0.097 |
| 0.32 | 0.088 | 0.050 |
| 0.00 | 0.038 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 0.560 | 4.520 | 8.800 | 0.640 | 5.080 | 9.320 |
| Standard deviation | 0.020 | 0.160 | 0.410 | 0.020 | 0.170 | 0.390 |
| C V (%) | 7.450 | 3.160 | 6.520 | 4.040 | 6.840 | 4.280 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 80-95 | 87 |
| EDTA plasma (n=8) | 80-96 | 87 |
| Cell culture media (n=8) | 80-92 | 85 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 88-97 | 95-103 | 86-97 |
| Average (%) | 94 | 102 | 94 | |
| 1:4 | Range (%) | 85-101 | 99-106 | 90-98 |
| Average (%) | 90 | 106 | 91 | |
| 1:8 | Range (%) | 86-98 | 80-92 | 80-93 |
| Average (%) | 87 | 83 | 91 | |
| 1:16 | Range (%) | 96-107 | 83-97 | 92-105 |
| Average (%) | 105 | 96 | 102 |