今天,Reedbiotech小编来给大家讲解一下最近的一篇比较经典的文献,北京中医药大学王雪茜老师通过抗体阵列和生物信息学分析方法发现了黄芩苷对脑缺血大鼠NFκB/CCL2/CCR2信号通路的潜在调节作用。该文献题为Identification of potential regulating effect of baicalin on NFκB/CCL2/CCR2 signaling pathway in rats with cerebral ischemia by antibody-based array and bioinformatics analysis,发表在Journal of Ethnopharmacology期刊上。
1. 黄芩苷和脑缺血的关系?为什么要研究
黄芩苷是黄芩根中提取的黄酮化合物,可用于治疗脑缺血。但是,令人遗憾的是黄芩苷的生物学机制不明确。文章旨在结合抗体阵列和生物信息学分析,以探讨黄芩苷抗脑缺血的潜在生物学机制。
2. 方法
文章利用SD大鼠建立MCAO模型即脑缺血模型(这个造模的方法后续有机会我们再详细讲解),将其分为对照组、模型组以及黄芩苷处理组。同时结合体外实验,利用LPS诱导的 RAW 264.7巨噬细胞模型来观察黄芩苷的作用。
非实验部分:抗体微阵列筛选表达量高的蛋白质CCL2,同时利用相关数据库筛选到黄芩苷靶蛋白CCL2的转录因子以及在相关转录因子CCL2基因上的结合位点及潜在启动子区。
实验部分:主要有ELISA、Western-blot、H&E染色、免疫荧光染色实验
3. ELISA数据展示
脑缺血后,各种细胞因子和趋化因子被激活,介导炎症反应增加,活性氧释放,神经元损伤,进一步影响疾病的发展。炎症反应是缺血性脑损伤病理进展的显著加速器,可影响患者的神经功能和疾病结果。文章通过ELISA实验,定量检测大鼠脑组织中的炎症因子TNF-α和IL-6(一般来说,TNF-α、IL-6以及IL-1β为常见的三大炎症因子指标)以及促炎趋化因子CCL2的含量(脑组织的蛋白质水平用总蛋白质归一化(即在ELISA实验前会做BCA定量实验,一般我们会建议客户做此实验以保证结果的准确性)。),发现模型组与对照组相比,模型组中相关因子含量显著上升;与模型组相比,黄芩苷处理过后的大鼠脑组织中相关因子含量要明显降低。这表明黄芩苷在一定程度上确实可以降低脑缺血后炎症反应。
4.反应机理图
脑缺血后,小神经胶质细胞会分泌促炎趋化因子CCL2,CCL2作用于单核巨噬细胞上的C-C趋化因子受体2型即CCR2,促进单核巨噬细胞大量释放炎症因子IL-6,TNF-α以及CCL2。而黄芩苷是可以直接抑制CCR2的激活,从而抑制炎症反应的进展。综上所述,参与脑缺血后的炎症反应这一进程,受到CCL2上下游的强烈介导。
4. 该文献中相关因子的ELISA产品,ReedBiotech有这些靶标吗?
我司拥有文献涉及到的ELISA产品,具体如下:
产品货号 |
检测靶标 |
种属 |
应用 |
产品链接 |
RE3186R |
大鼠IL-6 |
大鼠 |
ELISA |
http://reedbiotech.cn/pro/13574 |
RE1060R |
大鼠TNF-α |
大鼠 |
ELISA |
http://reedbiotech.cn/pro/13667 |
RE2731R |
大鼠CCL2 |
大鼠 |
ELISA |
http://reedbiotech.cn/pro/13591 |
以上为常规ELISA试剂盒,我司将,秉承以客户需求为纲的市场理念,不断创新、追求卓越,针对相关种属靶标,后续会推出Micro Fast(即MF)系列产品,敬请期待!