产品名称 | Human BNP(Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P16860 | 别称 | NPPB, GC-B, B-Type Natriuretic Peptide, Natriuretic Peptide Precursor B |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 75 pg/mL |
标准品 | 8000pg/mL | 检测范围 | 125-8000pg/mL |
样品类型 | Plasma;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway;Infection immunity;Hematology; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人BNP抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人BNP会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人BNP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人BNP抗体与结合在包被抗体上的人BNP结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人BNP浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人BNP的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
8000.00 | 2.440 | 2.418 |
4000.00 | 1.589 | 1.567 |
2000.00 | 0.947 | 0.925 |
1000.00 | 0.439 | 0.417 |
500.00 | 0.212 | 0.190 |
250.00 | 0.102 | 0.080 |
125.00 | 0.057 | 0.035 |
0.00 | 0.022 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 140.71 | 1806.15 | 3525.93 | 212.29 | 1859.79 | 3907.14 |
Standard deviation | 9.21 | 54.57 | 170.37 | 8.55 | 58.59 | 128.76 |
C V (%) | 2.83 | 4.43 | 6.00 | 3.00 | 6.43 | 3.95 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 82-95 | 88 |
EDTA plasma (n=8) | 94-105 | 98 |
Cell culture media (n=8) | 94-107 | 100 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 92-106 | 95-106 | 81-94 |
Average (%) | 100 | 101 | 85 | |
1:4 | Range (%) | 93-105 | 87-101 | 93-107 |
Average (%) | 96 | 98 | 93 | |
1:8 | Range (%) | 85-99 | 82-97 | 93-102 |
Average (%) | 92 | 90 | 97 | |
1:16 | Range (%) | 90-99 | 87-102 | 91-105 |
Average (%) | 92 | 98 | 104 |