产品名称 | 5-HT(5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
Uniprot ID | N/A | 别称 | 5HT; Serotonin; N-Methyl-Gamma |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 3.97 ng/mL |
标准品 | 900 ng/mL | 检测范围 | 14.07-900 ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenates; Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Signal transduction;Infection immunity;Neuro science;Gastroenterology; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用5-HT抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的5-HT与包被的5-HT竞争生物素标记的抗5-HT单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,5-HT浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中5-HT的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD |
---|---|
900.00 | 0.423 |
450.00 | 0.539 |
225.00 | 0.735 |
112.50 | 1.020 |
56.25 | 1.358 |
28.13 | 1.673 |
14.06 | 1.909 |
0.00 | 2.428 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 17.72 | 37.82 | 252.81 | 18.44 | 28.30 | 314.69 |
Standard deviation | 1.89 | 4.17 | 13.06 | 2.35 | 5.19 | 16.25 |
C V (%) | 6.14 | 6.24 | 5.65 | 6.82 | 5.34 | 4.20 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-95 | 91 |
EDTA plasma (n=8) | 81-95 | 88 |
Cell culture media (n=8) | 83-97 | 90 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-94 | 85-103 | 87-98 |
Average (%) | 87 | 101 | 91 | |
1:4 | Range (%) | 90-99 | 85-103 | 80-92 |
Average (%) | 92 | 87 | 85 | |
1:8 | Range (%) | 82-101 | 83-96 | 96-105 |
Average (%) | 82 | 94 | 104 | |
1:16 | Range (%) | 91-102 | 95-102 | 86-97 |
Average (%) | 96 | 97 | 92 |