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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Rat TNF-α(Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
| Uniprot ID | P16599 | 别称 | DIF, TNF-alpha, TNFA, TNFSF2, TNF-A, TNFα |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 9.38 pg/mL |
| 标准品 | 1000pg/mL | 检测范围 | 15.63-1000pg/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Infection immunity; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠TNF-α抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的大鼠TNF-α会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠TNF-α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠TNF-α抗体与结合在包被抗体上的大鼠TNF-α结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，大鼠TNF-α浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠TNF-α的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 1000.00 | 2.488 | 2.430 |
| 500.00 | 1.608 | 1.550 |
| 250.00 | 0.915 | 0.857 |
| 125.00 | 0.480 | 0.422 |
| 62.50 | 0.271 | 0.213 |
| 31.25 | 0.165 | 0.107 |
| 15.63 | 0.114 | 0.056 |
| 0.00 | 0.058 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 20.59 | 239.16 | 403.66 | 28.19 | 196.75 | 474.14 |
| Standard deviation | 1.04 | 11.30 | 24.25 | 1.31 | 11.98 | 18.77 |
| C V (%) | 4.67 | 3.08 | 5.78 | 5.31 | 4.52 | 5.07 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 84-92 | 87 |
| EDTA plasma (n=8) | 95-104 | 98 |
| Cell culture media (n=8) | 82-90 | 86 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 88-103 | 95-107 | 85-92 |
| Average (%) | 97 | 102 | 86 | |
| 1:4 | Range (%) | 83-94 | 92-103 | 83-96 |
| Average (%) | 90 | 101 | 93 | |
| 1:8 | Range (%) | 92-105 | 81-99 | 93-102 |
| Average (%) | 101 | 98 | 96 | |
| 1:16 | Range (%) | 89-97 | 90-98 | 87-98 |
| Average (%) | 91 | 93 | 97 |
检测流程/ Assay Procedures
