当前位置：
说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | MF-Human TNF-α(Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
| Uniprot ID | P01375 | 别称 | DIF, TNF-alpha, TNFA, TNFSF2,TNF,TNFa |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 4.69 pg/mL |
| 标准品 | 500pg/mL | 检测范围 | 7.81-500pg/mL |
| 样品类型 | 血清，血浆，组织匀浆及其它生物样品；上样量：25μL | ||
| 检测时间 | 3小时 | 研究领域 | Cancer, Immunology |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人TNF-α抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人TNF-α会与包被抗体以及生物素化的抗人TNF-α抗体结合，游离的成分被洗去。然后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，抗人TNF-α抗体与结合在包被抗体上的人TNF-α结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，人TNF-α浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中人TNF-α的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 500.00 | 3.258 | 3.169 |
| 250.00 | 1.791 | 1.702 |
| 125.00 | 0.905 | 0.816 |
| 62.50 | 0.425 | 0.336 |
| 31.25 | 0.267 | 0.178 |
| 15.63 | 0.175 | 0.086 |
| 7.81 | 0.131 | 0.042 |
| 0.00 | 0.089 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 8.75 | 108.16 | 226.040 | 11.06 | 126.330 | 253.200 |
| Standard deviation | 0.69 | 4.94 | 11.77 | 0.50 | 4.57 | 11.83 |
| C V (%) | 5.48 | 7.36 | 5.57 | 7.17 | 4.01 | 5.62 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 80-90 | 85 |
| EDTA plasma (n=8) | 84-106 | 100 |
| Cell culture media (n=8) | 87-93 | 90 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 85-94 | 93-102 | 80-93 |
| Average (%) | 90 | 96 | 92 | |
| 1:4 | Range (%) | 87-96 | 93-102 | 88-97 |
| Average (%) | 91 | 101 | 92 | |
| 1:8 | Range (%) | 82-95 | 80-92 | 86-92 |
| Average (%) | 84 | 88 | 87 | |
| 1:16 | Range (%) | 81-93 | 87-98 | 95-103 |
| Average (%) | 88 | 92 | 96 |
检测流程/ Assay Procedures
相关文献/ Citations(1)
日期：2024-01-10
IF：/